Né en 1847, Stefan est le frère cadet de Damon. On découvre qu'ils ont tous deux été amants de Katerina Petrova, qui les a vampirisés en 1864, à 18 ans ; Damon voue une grande haine à son frère depuis. Peu après sa transformation, Stefan a été aidé par Lexie, une autre vampire (que Damon tue peu après), pour apprendre à contrôler sa soif de sang.

Après plusieurs décennies, Stefan revient à Mystic Falls après avoir sauvé Elena (chose qu'elle apprend plus tard) de l'accident de voiture qui a coûté la vie à ses parents. Il avait alors remarqué l'exacte ressemblance d'Elena avec Katerina Petrova et est de ce fait, fortement intrigué. Il rencontre officiellement la jeune femme à la rentrée des classes et les deux adolescents entament une relation amoureuse. Mais Damon, également de retour dans la petite ville, succombe lui aussi au charme d'Elena.

Un peu plus tard la jeune femme découvre qu'il est un vampire ; mais il se distingue d'eux par son régime alimentaire inhabituel fait uniquement de sang animal, bien que cela réduise ses capacités. Les deux frères ont la particularité de ne pas se consumer au soleil grâce à une chevalière ensorcelée. Lorsque Katherine réapparait à Mystic Falls, elle avoue à Stefan qu'elle a toujours été amoureuse de lui, mais il la rejette froidement ne la croyant pas . La relation entre Stefan et Damon s'améliore au fil du temps. D'ailleurs, Stefan est contraint de rejoindre le machiavélique Klaus, seul lui peut guérir une morsure de loup-garou grâce a son sang dont est victime Damon.

Il est contraint de servir Klaus, qui le force à tuer et à se nourrir de sang humain. Il joue un double jeu, en servant Klaus pour protéger Elena. Mais Klaus, après avoir découvert qu'Elena est toujours en vie, finit par hypnotiser Stefan, qui redevient alors l'« éventreur ». Stefan est libéré de l'emprise de Klaus mais ne supporte pas ce qu'il a fait et refuse de "rallumer" son humanité. Toutefois, il prouve son amour encore présent pour Elena car il frappe Damon lorsqu'elle lui apprend qu'il y a eu un baiser entre son frère et elle. Il sauve Matt avant Elena, ce qui l'oblige a devenir vampire... Il s'en veut mais est là pour l'aider dans sa transition, il ne veut pas qu'elle fasse les mêmes erreurs que lui. Stefan compte retrouver une vieille connaissance Edward, pour l'aider. En faite, surtout pour aider Elena contre sa dépendance pour le sang et fuir Klaus et les chasseurs qui sont à ses trousses.